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ELISA試劑盒(鼠Elisa試劑盒)實驗中常見問題剖析

日期:2020-11-17 01:02
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摘要:
Q1.標曲不顯色或顯色很弱,樣本顯色:
   溶解標準品以及倍比稀釋時,未渦旋轟動或不可充沛。
   標準品溶解、倍比稀釋時均需求渦旋轟動以保證充沛混勻。單純依托移液器重複吹打,效率較低、效果也不必定jia。
Q2.樣本經不同梯度稀釋,ELISA試劑盒(鼠Elisa試劑盒)核算得到的樣本值差異較大:
   有時分咱們不清楚樣本中目的蛋白的濃度怎樣,應該怎樣稀釋,那麽咱們就會做下預實驗,確認稀釋倍數。但是有時分同一樣本做了幾個不同梯度稀釋後,核算得到的樣本值之間差異較大。
Q3.本底偏高:
   樣本值測不到標曲的本底即Blank孔的OD值一般要求控製在0.1以下(關於高敏ELISA可以恰當放寬要求)。尤其是樣本值特別低的時分,本底過高會掩蓋目的信號,導致無法測到樣本值。在參加TMB顯色後,需實時觀察標曲顯se情況。通常在S5孔有肉眼可見的弱小藍色,即可中止反應。
Q4.標曲顯色,樣本不顯色:
   當樣本中目的蛋白濃度極低或者樣本中攪擾要素較強,就無法檢測到。現在ELISA試劑盒(鼠Elisa試劑盒)仍然是蛋白檢測活絡度gao的方法,與不同技能結合後,衍生出了多種類型的ELISA,提高了檢測活絡度。
Q5.不同試劑盒中的組分能否通用:
   除非是共用的試劑如洗液、檢測緩衝液,其它組分不主張用其它試劑盒的組分,乃至是同一目標不同批次的試劑盒裏的組分。這些組分(包含標準品、標準品稀釋液、檢測抗體、酶等)都是經過優化的,假如輕率運用其它試劑盒的組分,有或許對效果產生影響。 
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