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魚ELISA試劑盒樣本處理及要求
日期:2020-11-17 01:03
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摘要:
魚ELISA試劑盒樣本處理及要求:
1. 血清:將收集於血清分離管的全血標本在室溫放置2小時或4℃過夜,然後1000×g離心20 分鍾,取上清即可,或將上清置於-20℃或-80℃保存,但應避免反複凍融。
2. 血漿:用EDTA或肝素作為抗凝劑采集標本,並將標本在采集後的30分鍾內於2-8℃ 1000×g離心15分鍾,取上清即可檢測,或將上清置於-20℃或-80℃保存,但應避免反複凍融。
3. 組織勻漿:用預冷的PBS (0.01M, pH=7.4)衝洗組織,去除殘留血液(勻漿中裂解的紅細胞會影響測量結果),稱重後將組織剪碎。將剪碎的組織與對應體積的PBS(一般按1:9的重量體積比,比如1g的組織樣品對應9mL的PBS,具體體積可根據實驗需要適當調整,並做好記錄。推薦在PBS中加入蛋白酶抑製劑)加入玻璃勻漿器中,於冰上充分研磨。為了進一步裂解組織細胞,可以對勻漿液進行超聲破碎,或反複凍融。*後將勻漿液於5000×g離心5~10分鍾,取上清檢測。
4. 細胞培養物上清或其它生物標本:請1000×g離心20分鍾,取上清即可檢測,或將上清置於-20℃或-80℃保存,但應避免反複凍融。